怎么做可以降低ELISA試劑盒操作的布景噪音

　　在ELISA試劑盒的操作中，我們都認(rèn)為ELISA檢測的原理似乎很簡單，但要固定抗原，添加di一抗體、第二抗體和底物，并混合洗滌和關(guān)閉。然而，即使是普通的刷牙和關(guān)閉，如果做不好，可能已經(jīng)破壞了整個(gè)實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，我們能否得到有意義的信息在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。設(shè)定噪音會(huì)影響你對(duì)結(jié)果的判斷。今天，我們教大家如何降低ELISA試劑盒操作的設(shè)定噪音。

　　首先，洗滌是非常重要的：洗滌步驟看起來很無聊，事實(shí)上，非常重要，因?yàn)槿绻唇壎ǖ臄?shù)據(jù)(如非特異性結(jié)合抗體或檢測試劑)留在微孔板上，則會(huì)增加設(shè)定噪音。如果必要的話，可以添加洗滌液中的鹽濃度，這將阻礙非特異性結(jié)合反應(yīng)。如果這套數(shù)據(jù)太高，而且你懷疑洗滌不夠，你可以測試你加入洗滌的次數(shù)。

　　其次，關(guān)閉是更關(guān)鍵的：關(guān)閉解決方案的作用是允許不相關(guān)的蛋白質(zhì)占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這減少了信號(hào)抗體非特異性結(jié)合的可能性。當(dāng)然，你也希望抗體只與目標(biāo)蛋白結(jié)合。如果你的設(shè)置過高，并且懷疑關(guān)閉量不夠，你可以測試使用更高濃度的關(guān)閉液，或者適當(dāng)延長關(guān)閉時(shí)間。

　　第三，抗體濃度必須優(yōu)化：我們通常跟隨兄弟姐妹留下的操作步驟，但如果試劑稍有不同，可能需要優(yōu)化抗體的數(shù)量。記住，非特異性抗體結(jié)合增加設(shè)置。為了避免這種情況，不要使用太多的初級(jí)抗體或第二抗體。

　　第四，檢測試劑應(yīng)該是適當(dāng)?shù)模毫硪稽c(diǎn)也很清楚：不要使用太多的檢測試劑。如果濃度太高，或者稀釋不當(dāng)，就會(huì)導(dǎo)致高集。如果需要，也不要過度著色，優(yōu)化何時(shí)應(yīng)該添加終止溶液。