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人ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作步驟

發(fā)表時(shí)間:2022-12-01 11:05

  實(shí)驗(yàn)想要順利進(jìn)行,我們必須按步驟來進(jìn)行,尤其是相關(guān)細(xì)節(jié)操作要重視。為了更好的進(jìn)行人ELISA試劑盒的應(yīng)用,下面為大家詳細(xì)介紹一下人ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作步驟。

  一、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:在小試管中進(jìn)行稀釋。

  二、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣,待測樣品孔中先加樣品稀釋液,然后再加待測樣品。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

  三、溫育:用封板膜封板后置室溫溫育半個(gè)小時(shí)左右。

  四、配液:將濃縮洗滌液用蒸鐳水稀釋后備用

  五、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置后棄去,如此重復(fù)幾次,拍干。

  六、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑,空白孔除外。

  七、再按照上述步驟進(jìn)行一次溫育和洗滌。

  八、顯色:每孔先加入顯色劑,輕輕震蕩混勻,室溫避光顯色十五分鐘。

  九、終止:每孔加終止液,終止反應(yīng)。

  十、測定:以空白空調(diào)零,依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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