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PCR實(shí)驗(yàn),一個(gè)看似復(fù)雜但理解后又會(huì)覺(jué)得簡(jiǎn)單的生物技術(shù)。

發(fā)表時(shí)間:2023-10-09 11:30

PCR,全稱(chēng)為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一種在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù),其步驟包括高溫變性模板、引物與模板退火、引物沿模板延伸三步反應(yīng)。首先,將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下使其變性解成單鏈。這是PCR的**步,也是非常關(guān)鍵的一步,它需要將雙鏈DNA分子完全分開(kāi)成單鏈。接下來(lái)是引物與模板退火,這是PCR的第二步,也是開(kāi)始合成新DNA的步驟。在這個(gè)階段,人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合。這兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短。最后是引物沿模板延伸,這是PCR的第三步。在這個(gè)階段,耐熱的DNA聚合酶在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。這一步的反應(yīng)不斷重復(fù),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。

11.jpg

PCR技術(shù)在科研、臨床診斷等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,也為我們帶來(lái)了很多便利??靵?lái)分享你知道的PCR技術(shù)的應(yīng)用吧!


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