如何選擇適合的環(huán)孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

環(huán)孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒的選擇要點(diǎn)

?特異性與靈敏度?

優(yōu)先選擇基于環(huán)孢子蟲保守序列設(shè)計(jì)的引物和探針，確保與其他微生物無交叉反應(yīng)?。

探針法通過特異性結(jié)合目標(biāo)序列釋放熒光信號，靈敏度可達(dá)100拷貝/反應(yīng)，適合低濃度樣本檢測?。

?操作便捷性?

即

開即用型試劑盒（如含預(yù)混PCR mix）可減少操作步驟，適合快速檢測?。

部分產(chǎn)品提供上樣染料或陽性對照，便于結(jié)果分析?。

?定量能力與線性范圍?

確認(rèn)試劑盒的線性范圍（如5個(gè)數(shù)量級），確保覆蓋目標(biāo)樣本的濃度梯度?。

探針法比染料法（如SYBR Green）更適合絕對定量，因熒光信號與目標(biāo)序列嚴(yán)格對應(yīng)?。

?兼容性與穩(wěn)定性?

選擇適配主流熒光定量PCR儀（如ABI、LightCycler）的試劑盒?。

注意儲(chǔ)存條件（通常為-20℃避光）和有效期（12個(gè)月）?。

?成本與用途?

探針法試劑盒價(jià)格通常高于染料法（如50次反應(yīng)約3490元），但特異性更優(yōu)?。

科研用途需確認(rèn)是否含活體樣本對照，部分產(chǎn)品僅提供DNA片段作為陽性對照?。

注意事項(xiàng)

若樣本量少或模板短，建議選擇含熱啟動(dòng)Taq酶的試劑盒以減少非特異性擴(kuò)增?。

避免反復(fù)凍融，運(yùn)輸時(shí)需低溫避光?。