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今天我司技術(shù)員就帶大家了解下ELISA實驗的原理和常見辦法

發(fā)表時間:2019-09-20 15:06

ELISA實驗是科研人員經(jīng)常用到的實驗方法。很多人覺得ELISA很簡單,其實不然。今天我司技術(shù)員就帶大家了解下ELISA實驗的原理和常見辦法。



實驗原理



1.包被:抗原/抗體,固相化



2.反響: 1)待測抗體/抗原; 2)酶標(biāo)抗原/抗體



3.洗滌:使結(jié)合在固相上的抗原抗體復(fù)合物與未結(jié)合的別離



4.底物顯色:定性/定量剖析



常用辦法



1.間接法



檢測抗體常用的辦法, 首要用于對病原體抗體的檢測。



優(yōu)勢:二抗能夠加強(qiáng)信號,并且有多種挑選能做不同的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保留它多的免疫反響性。



缺陷:交互反響發(fā)生的機(jī)率較高



2.雙抗體夾心法



檢測大分子抗原常用的辦法。



優(yōu)勢:高活絡(luò)、高專一性,抗原無須事前純化。



缺陷:抗原必定得具有兩個以上的抗體結(jié)合部位。



3.競爭法



檢測小分子半抗原(藥物、激素等)。



優(yōu)勢:可適用比較不純的樣本,并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。



缺陷:全體的敏感性和專一性都較差。


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