產(chǎn)品介紹

細(xì)胞名稱：人二倍體細(xì)胞/人胚肺成纖維細(xì)胞

形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣　

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：該細(xì)胞由中國(guó)藥品生物制品檢定所細(xì)胞室王佑春主任贈(zèng)送并保藏。細(xì)胞能作為多種人類病毒的宿主，用于病毒學(xué)基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。

培養(yǎng)條件： MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法： 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況： C10

凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

細(xì)胞冷凍保存：

1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）

2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過(guò)夜后液氮保存。

細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟：

1.人二倍體細(xì)胞/人胚肺成纖維細(xì)胞吸走用于培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞；

2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；

（細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感，消化過(guò)度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(zhǎng)。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時(shí)即可終止，禁止消化到細(xì)胞完全漂浮。混勻細(xì)胞時(shí)盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）

3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細(xì)胞混勻；

4.將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；

傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一，具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。