產(chǎn)品介紹

細胞名稱：人結(jié)直腸腺癌細胞長春新堿耐藥株

形態(tài)特性：上皮樣；多角形

生長特性：貼壁生長

特征特性：長春新堿耐藥。

培養(yǎng)條件： RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS + 2000ng/ml長春新堿

傳代方法： 1:4~1:8傳代，2~3天換液1次。

傳代情況：

凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+38%FBS

細胞冷凍保存：

1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實驗室條件自行選擇）

2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。

細胞培養(yǎng)的操作步驟：

1.人結(jié)直腸腺癌細胞長春新堿耐藥株吸走用于培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞；

2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；

（細胞對于消化比較敏感，消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài)，導(dǎo)致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時即可終止，禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）

3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細胞混勻；

4.將混勻的細胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；

傳代比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。