產(chǎn)品介紹

細(xì)胞名稱：人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)

形態(tài)特性：其他

生長特性：貼壁生長

特征特性：源自腦轉(zhuǎn)移灶的腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤。

培養(yǎng)條件： RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%

傳代方法：消化3-5分鐘。1：

2。3天內(nèi)可長滿。  

傳代情況： PN5

凍存條件：完全培養(yǎng)基+8%DMSO

細(xì)胞冷凍保存：

1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實驗室條件自行選擇）

2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。

細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟：

1.人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)吸走用于培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞；

2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；

（細(xì)胞對于消化比較敏感，消化過度會嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時即可終止，禁止消化到細(xì)胞完全漂浮?；靹蚣?xì)胞時盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）

3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細(xì)胞混勻；

4.將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；

傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一，具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。