產(chÇŽn)å“介紹
ç´°(xì)胞å稱:人胰腺導(dÇŽo)管癌細(xì)胞
形態(tà i)特性:上皮細(xì)胞
生長(zhÇŽng)特性:貼å£ç”Ÿé•·(zhÇŽng)
特å¾ç‰¹æ€§ï¼š CFPAC-1是胰腺管腺癌細(xì)胞系,建自26æ²ç™½äººç”·æ€§å›Šæ€§çº–ç¶è®Šæ€§ï¼ˆCF)的è‚轉(zhuÇŽn)移ç¶ã€‚ 該細(xì)胞系表é”(dá)囊性纖ç¶è®Šæ€§è·¨è†œèª¿(dià o)節(jié)å› å(CFTR)。 形態(tà i)ç‚ºä¸Šçš®æ¨£ä¸”é ‚ç«¯å¾®çµ¨æ¯›æ¥µåŒ–ã€‚è©²ç´°(xì)胞表é”(dá)胰腺管細(xì)胞特å¾æ€§çš„ç´°(xì)胞角蛋白和癌胚抗原。å€å¢žæ™‚(shÃ)間為30-32å°æ™‚(shÃ)。 它是亞3å€é«”çš„ç´°(xì)胞系,36ï¼…çš„ç´°(xì)胞的染色體模å¼æ•¸(shù)為75。 該細(xì)胞傳代至24代時(shÃ)在無(wú)胸腺å°é¼ ä¸è‡´ç˜¤ã€‚
培養(yÇŽng)æ¢ä»¶ï¼š IMDM:
Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 優(yÅu)質(zhì)胎牛血清
傳代方法:消化3-5分é˜ã€‚1:
2。4-5天長(zhǎng)滿。
傳代情æ³ï¼š P(20+5)
å‡å˜æ¢ä»¶ï¼šå®Œå…¨åŸ¹é¤Š(yÇŽng)基+8%DMSO
產(chÇŽn)å“å稱 | 人胰腺導(dÇŽo)管癌細(xì)胞 |
英文簡(jiǎn)稱 | CFPAC-1 |
狀態(tà i) | è²¼å£ |
ç´°(xì)胞冷å‡ä¿å˜ï¼š
1.å‡å˜æ¶²ï¼š92%完全培養(yÇŽng)基+8%DMSO(å¯ä»¥æ ¹æ“š(jù)實(shÃ)é©—(yà n)室æ¢ä»¶è‡ªè¡Œé¸æ“‡ï¼‰
2.é™æº«æ¥é©Ÿï¼š4度10min,-20度2h,-80éŽ(guò)夜åŽæ¶²æ°®ä¿å˜ã€‚
ç´°(xì)胞培養(yÇŽng)çš„æ“作æ¥é©Ÿï¼š
1.人胰腺導(dÇŽo)管癌細(xì)胞å¸èµ°ç”¨äºŽåŸ¹é¤Š(yÇŽng)åŸºï¼ŒåŠ å…¥3-5mL PBSåŽè¼•è¼•æ™ƒå‹•(dòng)培養(yÇŽng)瓶潤(rùn)æ´—ç´°(xì)胞;
2.å¸å¹²å‡ˆPBSåŽåŠ å…¥1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕æ–晃培養(yÇŽng)皿使胰酶浸沒(méi)ç´°(xì)胞表é¢ï¼ŒåŸ¹é¤Š(yÇŽng)瓶放37度培養(yÇŽng)箱消化;
(細(xì)胞å°(duì)于消化比較æ•æ„Ÿï¼Œæ¶ˆåŒ–éŽ(guò)度會(huì)åš´(yán)é‡å½±éŸ¿ç´°(xì)胞狀態(tà i),導(dÇŽo)致細(xì)胞傳代æ»äº¡æ¼‚浮或者傳代åŽä¸é•·(zhÇŽng)。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫è½ï¼Œå¯ä»¥è¼•è¼•å¹ä¸‹æ™‚(shÃ)å³å¯çµ‚æ¢ï¼Œç¦æ¢æ¶ˆåŒ–到細(xì)胞完全漂浮。混勻細(xì)胞時(shÃ)盡é‡è¼•æŸ”,ä¸è¦å¹å‡ºå¤§é‡æ°£æ³¡ã€‚)
3.åŠ å…¥6-8ml完全培養(yÇŽng)基終æ¢æ¶ˆåŒ–,輕輕å¹ä¸‹ç´°(xì)胞混勻;
4.將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,å†ç”¨æ–°é®®åŸ¹é¤Š(yÇŽng)基é‡æ‡¸37度培養(yÇŽng)箱繼續(xù)培養(yÇŽng)ï¼›
傳代比例: ä¸åŒç´°(xì)胞生長(zhÇŽng)速度ä¸ä¸€ï¼Œå…·é«”傳代比例視細(xì)胞生長(zhÇŽng)速度而定,大部分細(xì)胞é©ç”¨1:3-1:4傳代,生長(zhÇŽng)較慢的細(xì)胞å¯ä»¥1:2傳代。